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为探究被瘙痒激活的rACCPy神经元是否具有功能性抑制作用，研究人员利用c-Fos Tet-Off系统在大鼠双侧rACC中特异性地在“瘙痒标记”神经元中表达hM3Dq-mCherry或仅表达mCherry作为对照。在停用强力霉素后，通过面颊注射5-HT诱发瘙痒，使这些神经元被标记并表达相应蛋白。随后给予CNO以激活hM3Dq，结果发现：重新激活这群原本在瘙痒时活动下降的神经元，可显著减少由5-HT、compound 48/80和氯喹三种不同致痒剂诱发的抓挠发作次数及总抓挠时间。而在未给予CNO时，hM3Dq组与对照组无差异，排除了受体表达本身的影响。
在这一背景下，更重要的是，作者进一步聚焦于真正被瘙痒激活的那部分rACCPy→PAG神经元（即“瘙痒标记”亚群）。通过c-Fos依赖系统，仅让这群细胞表达hM3Dq或hM4Di。结果发现：重新激活它们可强力抑制多种致痒剂引起的抓挠，而抑制它们则加剧抓挠；且在不给予CNO时，各组无差异，排除非特异性效应。，这一点在Snipaste - 截图 + 贴图中也有详细论述
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